做试管婴儿 ,女方需要提供高质量的卵子 ,男方则要奉献优质的精子 ,方符合“门当户对”的条件 ,成就一段佳缘 。今天就给大家介绍一下实验室的月老们用哪些方法筛选“男神” 。
选“男神”的方法 ,即精液优化处理技术 ,它能够将精液中非精子成分(大量精浆 、上皮细胞 、白细胞和细菌等) ,以及一些大头小尾 、死亡 、活动不佳的低质量“渣男”进行有效剔除, 选出埋没在芸芸众生“长得帅 、跑得快”的男神精子 ,为体外授精中精子获能奠定基础 。
筛选的方法有四种 ,它们有各自的优缺点 :
1 、上游法 :一种常用于精液质量较好的优化方法 。将液化好的精液置于离心管底部 ,上方缓缓加入适量的人输卵管培养液 ,离心管倾斜45°置于37°C 、5%C02培养箱 。一段时间后 ,游动能力强的精子便会聚集到液面上方 ,死的 、老弱病残的精子就留在底部 。
优点 :对精子损伤小 ,能够得到较高活力的精子 ;操作简便 ,成本较低 。
缺点 :上游时间较长 ,回收率相对较低 ;无法处理液化不良的精液 ,对少弱精患者的精液 ,上游的精子可能不够多 。
2 、密度梯度离心法 :根据好精子的密度高于死的 、差的精子的特性 ,通过不同密度梯度液 ,离心后 ,好精子便留在离心管底部 ,如图 。
优点 :操作简便 ,处理时间短 ,实用性高 ,成本较低 。
缺点 :样本多次转移 、离心 ,对精子有一定损伤 。
3 、微流控芯片法 :目前已经开发了多种芯片 ,大多是根据精子具有贴壁 、趋流游动的特性 ,从而达到浓缩和筛选优质精子的目的 。制作材料一般为聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA) ,可以根据要求 ,灵活设计微管道的形状和尺寸 。
(几种芯片 ,图片来源于《SLAS Technology》)
优点 :操作标准化 、自动化 ,对精子损伤小 ,能够很好的筛选出高活力 、形态正常的精子 。
缺点 :优选后的精子浓度低 ,可能是因为各种管道对精子要求高 ,不适用于质量较差精液 ,尤其是对少精子症患者,所以临床上还没有广泛应用 。
4 、透明带结合法 :采用失去受精潜能的不成熟卵子去筛选高质量的精子 ,精子和卵透明带结合后,并不立即钻入透明带,而是被能动地粘在透明带的表面上 。
优点 :尽可能模拟自然选择的过程 ,能够客观的选择具有一定受精能力的精子 。
缺点:只适合采用第二代试管技术(ICSI)的精子 。
上述四种方法各有优缺点 ,为了能扬长补短 ,选出内外兼修的“男神” ,提高佳缘成功率 ,我们中心采用的是密度梯度离心法结合上游法进行筛选 。即先将精子进行密度梯度离心 ,再进行上游,就是笔试海选后又进行了体能复试 ,这样筛选出来的精子不仅活力高 、受到损伤小 ,还能够更好地剔除杂质成分的影响,减少其对精子功能的影响,对提高精子存活率 、DNA完整性具有较好作用 。